Effect of catalase, superoxide dismutase and reduced glutathione in LDL extender on ovine cryopreserved sperm viability

摘要

 Objetivou-se avaliar a motilidade, cinética e integridade das membranas de espermatozoides ovinos criopreservados em diluidores contendo 8% de LDL com antioxidantes enzimáticos em diferentes concentrações. Quatro carneiros da raça Santa Inês foram utilizados para formar quatro pools de sêmen (cada pool contendo ejaculados provenientes dos quatro carneiros, totalizando quatro ejaculados por animal). Cada pool de sêmen foi dividido em oito alíquotas para os seguintes tratamentos: 1) Tris-glicose-glicerol (TGG) + (16%) gema de ovo (controle 1); 2) TGG + 8% (g/L) LDL (controle 2); 3) TGG + 8% LDL + catalase 100 U/mL; 4) TGG + 8% LDL + catalase 200 U/mL; 5) TGG + 8% LDL + superóxido dismutase 100 U/mL; 6) TGG + 8% LDL + superóxido dismutase 200 U/mL; 7) TGG + 8% LDL + glutationa reduzida 5 mM; and 8) TGG + 8% LDL + glutationa reduzida 10 mM. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,25 mL, resfriadas (-0,25 °C/min), mantidas a 5 °C por duas horas e em seguida congeladas (-25 °C/ min) usando uma máquina de congelar TK4000®. Imediatamente depois da descongelação (38 °C/30 s), as amostras foram submetidas à análise computadorizada (CASA) para avaliação da motilidade e cinética. A integridade estrutural das membranas plasmática e acrossomal foi analisada utilizando corantes fluorescentes. A integridade funcional das membranas foi avaliada utilizando o teste hiposmótico. Como indicado pelo teste ANOVA, diferenças significativas (P<0,05) entre tratamentos só foram observadas para VCL, VSL e VAP. Para a variável VCL, os meios diluidores 2, 3, 4, 5, 6 e 7 foram similares e maiores que os diluidores 1 e 8, sendo os últimos semelhantes entre si. Para a variável VSL, os diluidores 3, 4, 5, 6 e 7 foram similares e maiores que os diluidores 1, 2 e 8, sendo os últimos semelhantes entre si. Para a variável VAP, os diluidores 3, 4 e 6 foram similares e maiores que o 1, 2, 5, 7 e 8, sendo os últimos semelhantes entre si. Em conclusão, os antioxidantes enzimáticos catalase e superóxido dismutase melhoraram a atividade protetora dos diluidores contendo LDL sobre os espermatozoides ovinos.